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TUhjnbcbe - 2025/5/26 17:11:00

Ficoll-Hypaque密度梯度离心法:

人外周血单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞,其体积、形状和比重与其他细胞不同,红细胞和多核白细胞比重较大,为1.左右,而淋巴细胞和单个核细胞比重为1.左右。利用密度在1.±0.g/L之间近于等渗的Ficoll-Hypaque混合溶液(称为淋巴细胞分层液)作密度梯度离心时,各种血液成分将按密度梯度重新分布聚集。血浆和血小板由于密度较低,故悬浮于分层液的上部;红细胞与粒细胞由于密度较大,故沉于分层液的底部;PBMC密度稍低于分层液,故位于分层液界面上,这样就可获得PBMC。

Percoll密度梯度离心法:

Percoll成分为硅化聚乙烯吡咯烷酮(PVP),为无毒,无刺激的新型密度梯度离心分离剂。聚乙烯吡咯酮包被的硅胶混悬液,它具有易成等渗、粘度低、无毒性、不引起细胞聚集等优点,已得到广泛引用。由于Percoll在培养基中颗粒大小不等,其在离心过程中自然形成密度梯度,从而将不同密度的细胞分离出来。将1份10×PBS与9份percoll储存液混合,制成等渗Percoll悬液,此悬液被认为是%Percoll悬液,其密度为1.g/ml,可通过用PBS(1x)或组织培养液稀释此%Percoll而获得适宜密度进行细胞分离,因为稀释度与密度线性相关。

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